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技術文章 / article
YMB-1細胞處理方法YMB-1細胞
2017-01-13 瀏覽次數：1697
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據到貨時細胞密度，細胞生長狀態等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術指導，請及時或郵件。
需要特別指出的是：如細胞出現問題，請于48h內及時反饋，本公司將竭誠為您服務！
一．貼壁細胞
1. 客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
4. 嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
5. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
7. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養瓶，37℃,5%CO2 培養。
二．懸浮細胞
1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基，37℃,5%CO2 培養。
三．一毫升小管操作方法 小管內也是此細胞。
1. 用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）。
2. 嚴格無菌操作，用吸管吸出管中細胞至9ml*培養基混勻。
3. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。
4.換新的細胞培養瓶，37℃,5%CO2 培養。
J774A.1
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