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2017-05-17 瀏覽次數(shù)：1540

血清10099-141血清的溶解與保存

血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用。

1、如果不用，先放置-80℃保存。

2、如果要用，可于4℃冰箱放置過夜，再在室溫溶解。

3、溶解好的血清應立即分裝，-80℃保存。

4、保存于-80℃的血清解凍時應先與4℃冰箱放置過夜再在室溫溶解。切勿直接放在室溫溶解。

細胞傳代方法

根據(jù)細胞生長的恃點，傳代方法有3種：

1．懸浮生長細胞傳代

離心法傳代：離心（1000轉(zhuǎn)/分）去上清，沉淀物加新培養(yǎng)液后再混勻傳代。

直接傳代法：懸浮細胞沉淀在瓶壁時，將上清培養(yǎng)液去除l／2一2／3，然后用吸管直接吹打形成細胞懸液再傳代。

2．半懸浮生長細胞傳代（雜交瘤）

此類細胞部分呈現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象，但貼壁不牢，可用直接吹

打法使細胞從瓶壁脫落下來，進行傳代。

3．貼壁生長細胞傳代

采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25％的胰蛋白酶液。

細胞冷凍保存

細胞應生長良好，處于對數(shù)生長期，密度為80%左右。

2.注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO質(zhì)量要好，應無菌且無色。

3.冷凍保存之細胞濃度：一般成纖維細胞1~3x106cells/ml，懸浮細胞5~10x106cells/ml，上皮細胞2~5x106。

4.凍存液的配方是：60%無血清培養(yǎng)液30%血清10%DMSO

HAKATA10099-141胎牛血清