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技術文章 / article
HAKATA10099-141胎牛血清的保存與溶解
2017-05-17 瀏覽次數：1516
血清10099-141血清的溶解與保存
血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被 除去的 血漿。其主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白 、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。
1、如果不用，先放置-80℃保存。
2、如果要用，可于4℃冰箱放置過夜，再在室溫溶解。
3、溶解好的血清應立即分裝，-80℃保存。
4、保存于-80℃的血清解凍時應先與4℃冰箱放置過夜再在室溫溶解。切勿直接放在室溫溶解。
細胞傳代方法
根據細胞生長的恃點，傳代方法有3種：
1．懸浮生長細胞傳代
離心法傳代：離心（1000轉/分）去上清，沉淀物加新培養液后再混勻傳代。
直接傳代法：懸浮細胞沉淀在瓶壁時，將上清培養液去除l／2一2／3，然后用吸管直接吹打形成細胞懸液再傳代。
2．半懸浮生長細胞傳代（雜交瘤）
此類細胞部分呈現貼壁生長現象，但貼壁不牢，可用直接吹
打法使細胞從瓶壁脫落下來，進行傳代。
3．貼壁生長細胞傳代
采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25％的胰蛋白酶液。
細胞冷凍保存
細胞應生長良好，處于對數生長期，密度為80%左右。
2.注意冷凍保護劑之品質。DMSO質量要好，應無菌且無色。
3.冷凍保存之細胞濃度：一般成纖維細胞1~3x106cells/ml，懸浮細胞5~10x106cells/ml，上皮細胞2~5x106。
4.凍存液的配方是：60%無血清培養液30%血清10%DMSO
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