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    hela-luci,Luciferase穩(wěn)定表達Hela細胞

    2020-05-29 瀏覽次數:920

    hela-luci,Luciferase穩(wěn)定表達Hela細胞

    一. 細胞特性

    細胞名稱:

    生長特性:貼壁 上皮細胞樣

    種  屬:人

    貨期(工作日):5—7

    培養(yǎng)難度:★★

     

    二. 培養(yǎng)條件

    培養(yǎng)基:90%DMEM(L)+10%FBS

    溫度:37℃     氣相:95%空氣,5%二氧化碳

     

    . 傳代方式

     

     

    1.用75%酒精噴灑整個培養(yǎng)瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行1-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代,一般2到3天換一次液;

     

    2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,傳代比例為1:3到1:8;

     

    3傳代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(第d一次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為d佳消化時間,記錄d佳消化時間,以便于下次消化),消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細胞,進行傳代。

     

    四. 凍存條件

    凍存條件:80%*培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO

    (*建議使用本公司無血清細胞冷凍液(H-W-100),用4度保存的冷凍液重懸細胞,直接凍存于-80°C。)

    長期存儲:液氮

    五. 供應限制

    該產品僅供研究使用。

     

    發(fā)貨方式

    我們采取兩種形式的細胞發(fā)貨方式:

      1. 復蘇發(fā)貨

                      a. T25瓶活細胞發(fā)貨

                      b. 血清重懸發(fā)貨

     

      2. 凍存管發(fā)貨(干冰發(fā)貨)
     對于采取凍存管方式發(fā)貨的客戶,為了保證可靠性我們會多發(fā)一管細胞(共2管),干冰覆蓋保溫運輸。

     

    復蘇及凍存發(fā)貨方式均為順豐速運,我們會根據收貨地址及溫度差異采取不同的發(fā)貨方式(T25/血清重懸/凍存/用戶),并在發(fā)貨前的3天內與您確認收貨地址及配送方式。

     

    歡迎江浙滬地區(qū)的客戶到實驗室上門自取(報銷路費)。

     

     

     

    蒂科生物論文基金獎勵方法

    獎勵對象:

    使用HAKATA系列產品(HAKATA全系列:血清、凍存液、試劑、細胞株等)培養(yǎng)細胞并在中文核心期刊雜志或SCI期刊雜志發(fā)表文章,且文章中材料和方法欄中標注我公司品牌名或公司名(英文:HAKATA或Shanghai Chuanqiu Biotechnology Co.,Ltd, China,中文:HAKATA或蒂科生物)

    該獎勵方案長期有效,歡迎大家與我們分享獲得成果的喜悅!

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