加入收藏 | 設為首頁 | 聯系我們

    產品搜索

    聯系我們

    聯系人:陳經理
    電話:021-56980380
    傳真:
    手機:17321440983
    地址:上海市嘉定區翔江公路518弄D座2樓

    技術文章 / article
    當前位置:首頁 > 技術文章 > pc-9細胞| pc-9細胞系 培養步驟

    pc-9細胞| pc-9細胞系 培養步驟

    2021-06-16 瀏覽次數:2156

    pc-9細胞| pc-9細胞系 培養步驟

    產品名稱:pc-9細胞

    中文名稱:人肺癌細胞;pc-9

    規格:T25

    復蘇周期:10個工作日左右

     

    培養步驟:

    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

     

    1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

    1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

    2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的*培養基終止消化。

    3.輕輕吹打細胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

    4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。

    PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿,加入5ml左右*培養基混勻,放入培養箱過夜培養后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續培養,視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

    2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

    方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

    方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

     

    3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

     

    PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿,加入5ml左右*培養基混勻,放入培養箱過夜培養后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續培養,視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

    化工儀器網

    推薦收藏該企業網站
    主站蜘蛛池模板: 亚洲Aⅴ无码一区二区二三区软件| 国产无线乱码一区二三区| 一区二区日韩国产精品| 日韩电影一区二区三区| 制服美女视频一区| 国产伦一区二区三区免费| 在线播放国产一区二区三区| 国产亚洲一区区二区在线| 日本美女一区二区三区| 精品免费国产一区二区| 一色一伦一区二区三区| 精品国产乱子伦一区二区三区| 日本不卡一区二区视频a| 国模无码一区二区三区不卡| 激情爆乳一区二区三区| 国产婷婷色一区二区三区深爱网| 亚洲AV无码一区二区三区牲色| 91video国产一区| 亚洲一区二区无码偷拍| 性色AV一区二区三区天美传媒| 亚洲一区二区三区丝袜| 国产乱人伦精品一区二区在线观看| 激情亚洲一区国产精品| 国产精品揄拍一区二区| 亚洲综合在线一区二区三区| 99精品国产一区二区三区2021 | 免费精品一区二区三区在线观看| 亚洲综合色一区二区三区小说 | 国产福利电影一区二区三区,免费久久久久久久精| 国产精品视频一区二区三区| 精品无码人妻一区二区三区| 精品无码av一区二区三区| 激情内射亚洲一区二区三区爱妻 | 国产丝袜美女一区二区三区| 国产精品无码一区二区三区电影| 亚洲成AV人片一区二区密柚| 久久亚洲一区二区| 亚洲av成人一区二区三区观看在线 | 国产精品美女一区二区| 一区二区三区四区精品| 久久久久成人精品一区二区|