ELISA的原理及基本類型

Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
本文將通過一下幾點(diǎn)詳細(xì)的闡述Elisa試劑盒：
1.Elisa的原理
2.Elisa的類型

Elisa的原理：
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。
進(jìn)行檢測時，樣品中的受檢物質(zhì)（抗原或抗體）與固定的抗體或抗原結(jié)合。通過洗板除去非結(jié)合物，再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，此時，能固定下來的酶量與樣品中被檢物質(zhì)的量相關(guān)。通過加入與酶反應(yīng)的底物后顯色，根據(jù)顏色的深淺可以判斷樣品中物質(zhì)的含量，進(jìn)行定性或定量的分析。
由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的靈敏度。

Elisa的類型：
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。這種測定方法中有3種必要的試劑：

1. 固相的抗原或抗體；

2. 酶標(biāo)記的抗原或抗體；

3. 酶作用的底物。

根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀及檢測的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。

1. 雙抗體夾心法測抗原

針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體。適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。

2. 競爭法測抗原

首先將特異性抗體包被于固相載體表面，經(jīng)洗滌后分成兩組：一組加酶標(biāo)記抗原和被測抗原的混合液，另一組只加酶標(biāo)記抗原，經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色，這兩組底物降解量之差，即為所要測定的未知抗原的量。此方法測定的抗原只要有一個結(jié)合部位即可，對小分子抗原如激素和藥物類的測定常用此法。優(yōu)點(diǎn)是快，缺點(diǎn)是需要較多量的酶標(biāo)記抗原。

3. 免疫抑制法測抗原

被檢標(biāo)本對底物顯色的抑制程度與標(biāo)本中所含抗原的量成正比，二者之差即為預(yù)測抗原的量。

4. 間接法測抗體

是檢測抗體常用的方法，原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體。

本法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標(biāo)抗體檢測各種與抗原相應(yīng)的抗體。主要用于對病原體的檢測而進(jìn)行傳染病的診斷。