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    做實驗選擇原代細胞還是細胞株?

    2022-03-01 瀏覽次數(shù):1814

    各種已被命名和經(jīng)過細胞生物學鑒定的細胞系或細胞株,都是一些形態(tài)比較均一、生長增殖比較穩(wěn)定的和生物性狀清楚的細胞群。因此凡符合上述情況的細胞群也可給以相應的名稱,即文獻中常稱之為已鑒定的細胞(Certified Cells)。已鑒定的細胞可用于各種實驗研究和生產(chǎn)生物制品,當前世界上已建的各種細胞系(株)已難勝數(shù)。


    體外培養(yǎng)細胞的種類和命名

    體外培養(yǎng)細胞的名稱,隨培養(yǎng)細胞技術的發(fā)展和細胞種類的增多而演變。最早采用的名稱為細胞株(Cell strain),以后又出現(xiàn)細胞系(Cell Line)一詞,兩者曾一度混用致概念不明確,導致文獻中也很混亂。

    名詞的由來

    細胞株(cell strain)最初為W.Earle(1940)所采用,他把自己建立的小鼠結締組織L系稱為“株",1951年,George Gey把其建立的人體宮頸癌細胞Hela系稱為“株"。1954年,White另外使用了“系"來稱呼A Carrel培養(yǎng)的雞胚心臟的細胞群,細胞系(cell line)由此產(chǎn)生,之后這兩個名詞長期混用。

    即使在1979年國際組織培養(yǎng)協(xié)會專業(yè)術語委員會頒布“專業(yè)名詞建議"和1984年在寧波召開的全國動物組織和細胞培養(yǎng)會議通過“動物細胞、組織和器官培養(yǎng)技術中的一些術語的譯名和解釋"之后,到目前為止國內(nèi)對這兩個名詞的使用仍是混亂的,不僅在商品名中混用,在專業(yè)文獻中亦有混用現(xiàn)象。

    現(xiàn)將細胞系和細胞株區(qū)分如下:

    1、細胞系(Cell Line):原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功即成細胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系(Lineage of Cells)所組成。

    2、細胞株(Cell Strain):通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物稱為細胞株。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。如果不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限,稱為有限細胞株(finitecell strain);如果可以連續(xù)傳代,稱為連續(xù)細胞株(continuous cell strain)。對于人類腫瘤細胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。

    因此,細胞系泛指可傳代的細胞,細胞株是具有特殊性質(zhì)的細胞系。

    (一)初代培養(yǎng)

    初代培養(yǎng)又稱原代培養(yǎng),即直接從體內(nèi)取出的細胞、組織和器官進行的第一次的培養(yǎng)物。一旦已進行傳代培養(yǎng)(Subculture)的細胞,便不再稱為初代培養(yǎng),而改稱為細胞系。

    (二)細胞系

    初代培養(yǎng)物開始第一次傳代培養(yǎng)后的細胞,即稱之為細胞系。如細胞系的生存期有限,則稱之為有限細胞系(Finite Cell Line);已獲無限繁殖能力能持續(xù)生存的細胞系,稱連續(xù)細胞系或無限細胞系(Infinite Cell Line)。

    無限細胞系大多已發(fā)生異倍化,具異倍體核型,有的可能已成為惡性細胞,因此本質(zhì)上已是發(fā)生轉化的細胞系。無限細胞系有的只有永生性(或不死性),但仍保留接觸抑制和無異體接種致癌性;有的不僅有永生性,異體接種也有致瘤性,說明已惡性化。

    這兩種不同性質(zhì)的無限細胞系,在國內(nèi)外文獻中對這些名詞的應用上也常不十分嚴格。為概念上的明確,對有惡性的無限細胞系采用“惡性轉化細胞系"一詞表示可能更妥。而對那些只具永生性而無惡性的細胞系,則用無限細胞系或轉化細胞系即可。如 NIH3T3、Rat-1、10T1/2等均屬這類細胞系。

    由某一細胞系分離出來的、在性狀上與原細胞系不同的細胞系,稱該細胞系的亞系(Subline)。

    (三)克隆細胞株

    從一個經(jīng)過生物學鑒定的細胞系用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,單細胞增殖形成的細胞群,稱細胞株。再由原細胞株進一步分離培養(yǎng)出與原株性狀不同的細胞群,亦可稱之為亞株(Substrain)

    (四)二倍體細胞

    細胞群染色體數(shù)目具有與原供體二倍細胞染色體數(shù)相同或基本相同(2n細胞占75%或80%以上)的細胞群,稱二倍體細胞培養(yǎng)。如僅數(shù)目相同,而核型不同的即染色體形態(tài)有改變者為假二倍體。二倍體細胞在正常情況下具有限生命期,故屬有限細胞系。但隨供體年齡和組織細胞的不同,二倍體細胞的壽命長短各異。

    人胚肺成纖維細胞可傳50代土10代,人胚腎只有8~10代,人胚神經(jīng)膠質(zhì)細胞15~30代;如從老齡個體取可傳50則細胞生存期更短。由不同年齡供體取材建立的二倍體細胞系可供研究衰老之用。

    為保持二倍體細胞能長期被利用,一般在初代或2~5代即大量凍存作為原種(Stook Cells),用時再進行繁殖,用后再繼續(xù)凍存,可供長期使用或延緩細胞的衰老。

    做實驗選擇原代細胞還是細胞株?

    原代細胞:從體內(nèi)直接分離的細胞。功能、代謝、形態(tài)類似體內(nèi)細胞的特點,因此原代細胞適用于分析單個細胞形態(tài)、代謝、功能。原代細胞的缺點是:細胞均一性差,因為從特定組織取下來的原代細胞可能處于不同的發(fā)育時期。增殖能力差、培養(yǎng)時間受限、轉染效率低。

    細胞株:原代細胞經(jīng)過長期培養(yǎng)和篩選后,功能、代謝、形態(tài)趨于均一化的無限增殖細胞。適用于整體水平實驗。優(yōu)點是:容易培養(yǎng)、好感染、干擾因素少、便于同步化、實驗好操作。缺點是:與整體差別大、可能喪失原代細胞的特性,細胞株在長期傳代過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生變異。所以同一個學名的細胞株,有可能有*不同的形態(tài)、代謝、功能表現(xiàn)。不同代數(shù)的細胞株,性質(zhì)也可能*不同。

    原代細胞由于轉染效率低這個問題,應用受到了限制。自從腺病毒誕生后,因為其強大的感染能力,克服了原代細胞難感染的問題,使得原代細胞的使用變得更加簡單。由于細胞實驗后,很多時候需要做到動物體內(nèi),由于原代細胞有體內(nèi)細胞的特點,為了細胞實驗和動物體內(nèi)實驗的結果更加趨向一致性,因此用原代細胞來進行細胞實驗更值得考慮。

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