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技術(shù)文章 / article
動物血清的正確熱滅活方法
2022-09-28 瀏覽次數(shù)：1126
動物血清的熱滅活非常容易造成蛋白析出增多，若非必要，可以無需做此操作。若必須做動物血清的熱滅活，請嚴格遵守以下步驟：
1、保證血清*融化狀態(tài)，溫度接近常溫。
2、保證水浴溫度56℃、30分鐘的原則，在水浴過程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子，使血清內(nèi)部受熱均勻，直至滅活時間結(jié)束。
注意事項：
溫度過高、時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多，甚至嚴重影響血清的品質(zhì)。在56℃水浴中，持續(xù)恒溫30分鐘。在此過程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子，使其受熱均勻，減少蛋白的析出。
為什么要熱滅活血清？
加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究，培養(yǎng)ES細胞，昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。
實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是小黑點，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間，更確保血清的質(zhì)量!
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