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技術(shù)文章 / article
細(xì)胞培養(yǎng)為什么要先裂解紅細(xì)胞？
2022-12-13 瀏覽次數(shù)：829
紅細(xì)胞裂解液
一、基本介紹
紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞簡便易行的方法，即用裂解液裂解紅細(xì)胞，它 既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除 方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化，淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì) 胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細(xì)胞的去除。經(jīng)紅細(xì)胞裂解液裂解得到的組織細(xì)胞中不 含紅細(xì)胞，可進(jìn)一步用于原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、流式細(xì)胞分析、核酸與蛋白的分離和 提取等。
二、使用說明
①組織細(xì)胞樣品
1、新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個細(xì)胞懸液，離心棄去上清液。
2、從4℃冰箱中取出 ELS裂解液，按 1:3-5 的比例向細(xì)胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml 細(xì)胞壓積加入 3-5ml裂解液），輕輕吹打混勻。
3、 800-1000rpm離心 5-8 分鐘，離心棄去上層紅色清液。
4、收集沉淀部分，加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗 2-3 次。
5、如裂解不可重復(fù)步驟2和3。
6、重懸細(xì)胞，用于后續(xù)實驗；如提取RNA，最好是于步驟4開始使用DEPC水配制 的溶液中進(jìn)行
紅細(xì)胞的生命周期非常短，一般只有120天，但是他繁殖的血特別快，用他的話就會特別的能體現(xiàn)細(xì)胞的分裂，然后他是所有細(xì)胞中分裂最快的所以這個細(xì)胞他是非常的有有價值的，所以對于細(xì)胞培養(yǎng)他非常的有用。就是它的構(gòu)造非常簡單，里面沒有任何的細(xì)胞器，只有細(xì)胞膜跟蛋白質(zhì)。
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