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    WM-983B細胞,WM-983B細胞, 蒂科生物

    2017-01-17 瀏覽次數(shù):1624

    細胞細胞培養(yǎng)面面觀

    具體步驟:

    1.將水浴鍋預熱至40℃

    2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。

    3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。

    4.根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。

    5.從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。

    6.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。

    7.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,

    8.平衡后,放入離心機中3000r/min 離心3min

    9.吸棄上清液。

    10.向凍存管內(nèi)加入1ml培養(yǎng)液,吹打制成細胞懸液。

    zui后將細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)12-24小時后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細胞情況而定。
     

    注意事項:

    1>復蘇時選用的培養(yǎng)基要符合凍存管上標明的培養(yǎng)基。2>操作人員應(yīng)戴防護面罩及手套,防止冷凍管可能爆裂之傷害。3>自液氮或干冰容器中取出冷凍管,檢查蓋子是否旋緊,由于熱脹冷縮過程,此時蓋子易松掉。

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