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    A549/Taxol細胞-A549/Taxol耐藥株生長狀態(tài)

    2017-04-12 瀏覽次數(shù):1426

    編號:MXC027                        
    細胞株名稱:A549/Taxol人肺癌紫杉醇耐藥株
    種屬:人
    組織來源:肺癌
    生長特性:貼壁生長
    形態(tài)特征:上皮細胞
    微生物及支原體檢測:陰性
    安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。
    培養(yǎng)條件:
     
     
     
    *培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+200ng/ml Taxol
    血清我們推薦用:
    HAKATAFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。
    培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%
    傳代方法:
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
    收到細胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
    (一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
    (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
    1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
    2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
    3. 按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。
    注:觀察細胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X或20X物鏡下。
    2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
    3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
    4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們。..
     
    凍存方法:  凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO
      儲存:液氮儲存

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