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    K562/Adr細胞-K562/Adr耐藥株 培養

    2017-04-12 瀏覽次數:1329

    白血病阿霉素耐藥株K562/Adr

     

    人白血病阿霉素耐藥株K562/Adr  株特性:

    生長特性:貼壁生長

    形態特征:上皮細胞

    微生物及支原體檢測:陰性

    安全性:所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

    (一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,換 10ml新鮮培養液后繼續培養。

    ()如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:

    1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

    2. 1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,倒放于37℃培養箱1-3分鐘預熱,之后翻轉培養瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量*培養基終止消化。

    3. 6-8ml/瓶補加*培養基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。

    人白血病阿霉素耐藥株K562/Adr 注意事項:

    1、觀察細胞在低倍鏡(45X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X20X物鏡下。

    2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基,細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。

    3、有些細胞貼壁不牢,如發現貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內。

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