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    BIU-87/Adr耐藥株收到貨處理方法

    2017-04-12 瀏覽次數:1510

    BIU87/ADR人膀胱癌阿霉素耐藥株
    以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時或郵件。
    需要特別指出的是:如細胞出現問題,請于48h內及時反饋,本公司將竭誠為您服務!

    注:耐藥細胞培養操作流程和普通細胞培養方法基本一致,只是在培養中會加藥維持篩選壓力!
    一.貼壁細胞  
    客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
    肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
    顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
    嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
    將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
    用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 
    1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2  培養。 
    二.懸浮細胞 
    1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
    2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
    3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
    4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
    5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2  培養。

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